三七又被稱為田七,是一種中華傳統(tǒng)的名貴藥物,從古至今就有“止血神藥”的美稱。可是,種類的缺乏是三七種植中存有關(guān)鍵的技術(shù)性難題,育種標(biāo)示和方式是苦惱三七育種的關(guān)鍵難題,而基因組測(cè)序?yàn)槿呷虻奶暨x育種、作用遺傳基因的發(fā)覺(jué)等出示了基礎(chǔ),也有益于三七產(chǎn)業(yè)鏈關(guān)鍵技術(shù)性難題的處理。
對(duì)于三七樣本DNA的提取,還是有一定的困難度,曾手工研磨但樣品不易研磨,整體研磨樣品不充分,影響實(shí)驗(yàn)效果。故今天的樣本研磨我們選用了浙江優(yōu)嘉的冷凍研磨機(jī),能夠快速、高效率的對(duì)樣本完成研磨。
但在對(duì)三七樣本的研磨過(guò)程中,還需注意。要將樣品盡量對(duì)稱性地置放,以保證研磨過(guò)程中的均衡。在對(duì)樣本進(jìn)行夾取的過(guò)程中需佩戴手套,用醫(yī)用鑷子夾取,防止被液氮凍傷。另外在樣本存于鋼罐內(nèi)的量不要超過(guò)鋼罐的三分之二,避免影響樣本的實(shí)際研磨效果。
冷凍研磨機(jī)對(duì)三七樣本的DNA提取研磨操作流程:
1.提前準(zhǔn)備兩個(gè)鋼罐和若干個(gè)研磨珠
2.將三七樣本切割成多個(gè)小塊,與研磨珠一起放進(jìn)鋼罐里,并扭緊外蓋
3.將鋼罐放進(jìn)配有液氮的器皿中,進(jìn)行冷凍預(yù)處理幾分鐘。取出時(shí)務(wù)必要戴上膠手套或應(yīng)用醫(yī)用鑷子將其夾出,以防液氮凍傷
4.將適配器放進(jìn)冷凍研磨機(jī)中固定不動(dòng),接入開關(guān)電源開啟冷凍作用開展預(yù)冷
5、將浸泡過(guò)液氮的鋼罐放置在適配器內(nèi),樣品盡量對(duì)稱放置,以保證研磨時(shí)的受力平衡,旋緊垂直定位螺旋,將安全鎖扣緊。設(shè)置樣本的研磨參數(shù),程序結(jié)束后即可得到研磨后的樣本。
樣本研磨前后對(duì)比圖: